の曝露を加えたところ、細胞の膨張と破裂、および死細胞染色が観察された。これらの変化は、露光後30分以内に観察され、NIR-PIT後のnecroticな細胞死の誘導を示唆している（図図33AA）。DLL3を発現していない非標的細胞の3T3-RFPに有意な変化は観察されなかった（図図33BB）。 次に、in vitro NIR-PITの効果を定量化するために、フローサイトメトリーとルシフェラーゼ活性を評価した。死細胞染色であるPropidium Iodide (PI)で評価した細胞死率は光のJに依存的に増加した。NIR-light単独またはRova-IR700単独では有意な細胞傷害性は観察されなかった（図図33CC）。ルシフェラーゼ活性は、NIR-PIT群において発光量の有意な減少を示した（図図33DD）。以上からDLL3を標的としたNIR-PITがin vitroで光用量依存的に細胞死を誘導することが確認された。 22..33.. 担担癌癌ママウウススモモデデルルににおおけけるるDDLLLL33をを標標的的ととししたたIInn vviivvoo NNIIRR--PPIITT In vivoでのNIR-PITの効果を証明するために、背部に1個の異種移植編を持つマウスを作成し、治療24時間前にrova-IR700 50ugを尾静脈から投与した。IR700の蛍光は、近赤外光照射後に減少した。対照群、近赤外光単独群、およびRova-IR700単独群の腫瘍発光は、腫瘍増殖のため漸増を示した。対照的に、NIR-PIT群のルシフェラーゼ活性はDay 2まで徐々に減少した（図図44AA）。腫瘍体積はDay 3とDay 7において対照群に対しNIR-PIT群で有意な縮小を認めた(PIT group vs. control group at day 17: *, P = 0.0212 < 0.05; PIT group vs control group at day 21: *, P = 0.0084 <0.01; PIT group vs light only group at day 21: *, P = 0.0123 <0.05; PIT group vs. light only group at day 24: *, P = 0.0136 < 0.01, Kruskal-Wallis test with posttest) （図図44BB）。IVIS spectrum CTでluciferase発光定量を行い、初回NIR-light照射前の発光との比を比較した。腫瘍の発光は初回NIR-light照射1日後と2日後に有意な発光の低下を認めた(各群5匹) (PIT group vs. light only group at (b): *, P = 0.0007 < 0.01; PIT group vs control group at (c): *, P = 0.0385 < 0.01, Kruskal-Wallis test with posttest) （図図44CC）。各群のマウスの生存を観察したところ、NIR-PIT群で有意な生存の延長を認めた(*p = 0.023 < 0.05, Log-rank test) （図図44DD）。 3. 今後の展開 本研究はThe LancetとCell誌の姉妹誌のEBioMedicineに出版された。 Isobe Y, Sato K*, Nishinaga Y, Takahashi K, Taki S, Yasui H, Shimizu M, Endo R, Koike C, Kuramoto N,Yukawa H, Nakamura S, Fukui T, Kawaguchi K, Yoshikawa C. TF, Baba Y, Hasegawa Y (*corresponding author) Near Infrared Photoimmunotherapy Targeting DLL3 For Small Cell Lung Cancer EBioMedicine. 2020 (52) 102632 今後、本研究結果を、すでに臨床研究でヒトに使われているRovalpituzumab Tesirine(Rova-T)へと組み合わせて肺がん制圧を目指したいと考えている。 4. 参考文献 1. Horn L, Mansfield AS, Szczęsna A, et al. N Engl J Med.2018;379(23):2220-2229. doi:10.1056/NEJMoa1809064 2. Saunders LR, Bankovich AJ, Anderson WC, et al. Sci Transl Med. 2015;7(302):302ra136-302ra136. doi:10.1126/scitranslmed.aac9459 3. Rudin CM, Pietanza MC, Bauer TM, et al. Lancet Oncol. 2017;18(1):42-51. doi:10.1016/S1470-2045(16)30565-4 4. Mitsunaga M, Ogawa M, Kosaka N, Rosenblum LT, Choyke PL, Kobayashi H. Nat Med. 2011;17(12):1685-1691. doi:10.1038/nm.2554 5. Sato K, Ando K, Okuyama S, et al. ACS Cent Sci. 2018:acscentsci.8b00565. doi:10.1021/acscentsci.8b00565 5. 連絡先 佐藤和秀1,2,3 1 名古屋大学高等研究院 S-YLC 2 名古屋大学高等研究院 最先端イメージング分析センター／医工連携ユニット 3名古屋大学大学院医学系研究科 呼吸器内科 Email: k-sato@med.nagoya-u.ac.jp TEL: 052-744-2167 (ext. 3133)住所：名古屋市昭和区鶴舞町６５ −67−
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